2-NITROFENYL-BETA-D-GLUKOPYRANOSID CAS: 2816-24-2

Substrát enzymu: ONPG se běžně používá jako substrát pro beta-galaktosidázu, enzym, který hydrolyzuje ONPG za vzniku žlutě zbarvené sloučeniny (o-nitrofenol), kterou lze snadno detekovat spektrofotometricky. Tuto enzymatickou reakci lze použít k měření aktivity beta-galaktosidázy, což z ONPG činí cenný nástroj v enzymologických studiích.

Molekulárně biologické testy: ONPG se používá jako substrát v různých molekulárně biologických testech, zejména v testech reportérového genu beta-galaktosidázy. V těchto testech se substrát na bázi ONPG používá k měření aktivity reportérového genu, která je obvykle regulována konkrétní sledovanou promotorovou sekvencí. Aktivita beta-galaktosidázy, indikovaná změnou barvy vznikající při hydrolýze ONPG, poskytuje cenné informace o aktivitě promotoru.

Analýza genové exprese: ONPG se také používá při analýze genové exprese. Propojením sledované promotorové sekvence s genem beta-galaktosidázy mohou vědci měřit aktivitu beta-galaktosidázy s použitím ONPG jako substrátu. Hladina aktivity beta-galaktosidázy odráží sílu a aktivitu promotoru, což umožňuje posouzení úrovní genové exprese.

Diagnostické aplikace: ONPG lze použít v diagnostických aplikacích, zejména při detekci patogenních mikroorganismů. Různé bakterie, jako je Escherichia coli a některé druhy Shigella a Salmonella, produkují beta-galaktosidázu, která může štěpit ONPG. Tato hydrolýzní reakce způsobuje viditelnou změnu barvy, kterou lze použít k určení přítomnosti těchto bakterií v klinických vzorcích.