IPTG CAS:367-93-1 Cena výrobce
Isopropyl β-D-1-thiogalaktopyranosid (IPTG) je syntetický analog laktózy, který se běžně používá ve výzkumu molekulární biologie a biotechnologických aplikacích.IPTG se primárně používá k indukci exprese genů v bakteriálních systémech, kde slouží jako molekulární spouštěč k zahájení transkripce cílových genů.
Když je IPTG přidán do růstového média, je absorbován bakteriemi a může se vázat na lac represorový protein, což mu brání v blokování aktivity lac operonu.Lac operon je shluk genů zapojených do metabolismu laktózy, a když je represorový protein odstraněn, dochází k expresi genů.
IPTG se často používá ve spojení s mutantním promotorem lacUV5, což je konstitutivně aktivní verze promotoru lac.Kombinací IPTG indukce s tímto mutantním promotorem mohou výzkumníci dosáhnout vysoké úrovně genové exprese.To umožňuje produkci velkého množství proteinu pro čištění nebo jiné následné aplikace.
Kromě genové exprese se IPTG také často používá v modro/bílých screeningových testech.V této technice je gen lacZ typicky fúzován s požadovaným genem a bakterie, které úspěšně exprimují tento fúzní gen, budou produkovat aktivní enzym p-galaktosidázu.Když je IPTG přidán spolu s chromogenním substrátem, jako je X-gal, bakterie, které exprimují fúzní gen, zmodrají v důsledku aktivity β-galaktosidázy.To umožňuje identifikaci a selekci rekombinantních kmenů, které úspěšně integrovaly požadovaný gen.
Indukce genové exprese: IPTG se běžně používá k indukci exprese cílových genů v bakteriálních systémech.Napodobuje přirozený induktor laktózy a váže se na lac represorový protein, čímž zabraňuje blokování lac operonu.To umožňuje transkripci a expresi požadovaných genů.
Exprese a čištění proteinů: Indukce IPTG se často používá k produkci velkého množství rekombinantních proteinů pro různé účely, jako jsou biochemické studie, terapeutická produkce nebo strukturální analýza.Použitím vhodných expresních vektorů a IPTG indukce mohou výzkumníci dosáhnout vysoké úrovně produkce cílových proteinů v bakteriálních hostitelích.
Modrý/bílý screening: IPTG se často používá v kombinaci s lacZ genem a chromogenním substrátem, jako je X-gal, pro modro/bílé screeningové testy.Gen lacZ je typicky fúzován s požadovaným genem a bakterie, které úspěšně exprimují tento fúzní gen, budou produkovat aktivní enzym p-galaktosidázu.Když jsou přidány IPTG a chromogenní substrát, rekombinantní kmeny exprimující fúzní gen zmodrají, což umožňuje snadnou identifikaci a selekci.
Studium genové regulace: IPTG indukce se běžně používá ve výzkumu ke studiu regulace genů a operonů, zejména lac operonu.Manipulací s koncentracemi IPTG a sledováním exprese složek operonu lac mohou výzkumníci zkoumat mechanismy genové regulace a roli různých faktorů nebo mutací.
Systémy genové exprese: IPTG je klíčovou složkou v několika systémech genové exprese, jako jsou systémy založené na promotoru T7.V těchto systémech se lac promotor často používá k řízení exprese T7 RNA polymerázy, která zase transkribuje cílové geny pod kontrolou sekvencí promotoru T7.IPTG se používá k indukci exprese T7 RNA polymerázy, což vede k aktivaci exprese cílového genu.
| Složení | C9H18O5S |
| Zkouška | 99 % |
| Vzhled | bílý prášek |
| Č. CAS | 367-93-1 |
| Balení | Malé a objemné |
| Skladovatelnost | 2 roky |
| Úložný prostor | Skladujte na chladném a suchém místě |
| Osvědčení | ISO. |
