Fenylgalaktosid CAS:2818-58-8

Vliv na aktivitu enzymu: Fenylgalaktosid se běžně používá k měření aktivity enzymu β-galaktosidázy.Když je fenylgalaktosid hydrolyzován β-galaktosidázou, uvolňuje p-nitrofenol.Akumulaci p-nitrofenolu lze kvantitativně měřit, což poskytuje pohled na aktivitu β-galaktosidázy.Tento efekt se využívá v aplikacích, jako jsou enzymové testy a screeningové systémy.

Analýza genové exprese: Fenylgalaktosid se často používá jako substrát v experimentech molekulární biologie ke studiu genové exprese.Gen lacZ, který kóduje p-galaktosidázu, je běžně fúzován s regulačními sekvencemi jiných požadovaných genů.Exprese genu lacZ a hydrolýza fenylgalaktosidu β-galaktosidázou může indikovat způsob exprese a úroveň studovaného cílového genu.

Screeningové systémy: Fenylgalaktosid je důležitou součástí screeningových systémů, které využívají aktivitu β-galaktosidázy.Jedním široce známým příkladem je metoda modro-bílého screeningu, která se používá k identifikaci rekombinantních nebo transformovaných buněk v experimentech molekulární biologie.Kolonie, které úspěšně přijaly rekombinantní DNA nebo prošly genetickou rekombinací, budou exprimovat β-galaktosidázu, což povede k hydrolýze fenylgalaktosidu a vytvoření modrého zbarvení.

Purifikace proteinů: V některých případech může být fenylgalaktosid použit jako ligand pro afinitní chromatografii k čištění proteinů, které se specificky vážou na β-galaktosidázu nebo jsou jí aktivovány.Požadovaný protein může mít afinitní značku nebo fúzní značku obsahující doménu vázající p-galaktosidázu.Průchodem proteinové směsi přes kolonu s imobilizovaným fenylgalaktosidem může být požadovaný protein selektivně zadržen a následně eluován.